1.7um粒徑BEH C18色譜柱適用pH1-12美國沃特世Waters

UPLC色譜柱及相關耗材

UPLC色譜柱

    2004年，沃特世公司推出了超高效液相色譜技術(UPLC：Ultra-Performance Liquid Chromatography)而為分離科學帶來了重大變革。在儀器技術與色譜柱技術上的創(chuàng)新，使液相色譜的分離度、速度和靈敏度達到先所未有的高度。在液相色譜技術發(fā)展的歷史中，*

次，對色譜顆粒技術與儀器設計同時進行創(chuàng)新，以滿足和跨越現(xiàn)代分析實驗室面臨的要求與挑戰(zhàn)，幫助分析科學家工作更成功，用戶組織商業(yè)項目效率更高、收益更大。

四十多年來，人們一直孜孜不斷的縮小色譜顆粒的粒徑以獲得更高的色譜分離效能。但到了近期，液相色譜技術到達一個發(fā)展瓶頸：受到儀器譜帶展寬和壓力限制的負面影響，更小粒徑的優(yōu)勢不再能*被表現(xiàn)出來。

UPLC系統(tǒng)移除了這些障礙！它使得填充以更小粒徑(1.7-1.8 μm)的色譜柱能達到理論性能，同時在壓力高達18,000psi(1241bar)條件下仍能精準輸送流動相，從而使液相色譜性能達到新境界。

沃特世持續(xù)發(fā)展與擴充UPLC色譜柱家族，至今已包括四大顆粒平臺(BEH、HSS、CSH和CORTECS)，并且將其擴展至HPLC粒徑。此外，有7種以應用為導向的UPLC固定相，服務于：SEC、氨基酸、蛋白質、肽、寡核苷酸和糖苷。沃特世擁有應對小分子分析和生物制藥分析所需的各種選擇性，我們?yōu)槟膽眯枰峁︰PLC色譜柱解決方案。

ACQUITY UPLC顆粒技術

BEH亞乙基橋雜化顆粒技術(Ethylene Bridged Hybrid：BEH)

1.7μm的BEH顆粒是UPLC技術的主要支撐者。目前它有4種孔徑(125 ?，130 ?，200 ?和300 ?)和幾種固定相，用于反相色譜和HILIC色譜，適用分析物從小分子到大的生物制藥分子。由于雜化顆粒技術的突出化學穩(wěn)定性，更寬泛的pH條件 (pH 1-12)可以被采用，從而使方法開發(fā)工作獲得更通用和耐受的分離工具。

BEH 顆粒技術也具有HPLC粒徑產(chǎn)品 (2.5, 3.5, 5, 和10 μm) 對應XBridgeHPLC 柱家族，這確保在HPLC和UPLC技術平臺之間方法可無縫轉換。

HSS高強度硅膠(High Strength Silica：HSS)

具有高孔容的HPLC顆粒不具有足夠的機械穩(wěn)定性來承受UPLC分離技術所需要的高壓、這一局限導致沃特世材料科學家研發(fā)出新的硅膠顆粒技術，專為提高機械強度以及具備合適的形態(tài)，以耐受高壓條件而具有好的柱壽命和UPLC效率。于是，1.8 μm HSS顆粒，是*個*硅膠顆粒，專門設計、測試以供UPLC應用，耐壓高達18,000 psig(1241 bar)。

HSS顆粒技術也具有HPLC粒徑產(chǎn)品(2.5, 3.5和5 μm)，對應于XSelect HSS HPLC柱家族，這確保在HPLC和UPLC技術平臺之間方法可無縫轉移。

CSH表面帶電雜化顆粒技術(Charged Surface Hybrid：CSH)

1.7 μm的CSH顆粒是沃特世第三代雜化顆粒技術?；谖痔厥繠EH(亞乙基橋雜化)顆粒技術，CSH顆粒帶有低水平的表面電荷，設計在低離子強度流動相條件下提高樣品載量和峰對稱性，同時仍維持BEH顆粒技術固有的機械與化學穩(wěn)定性。

CSH技術的優(yōu)勢包括：

• 對于堿性化合物的*峰形
• 提高載量
• 更換流動相pH后柱再平衡速度快
• 改善的批次之間重現(xiàn)性
• 在低pH和高pH條件下優(yōu)異的穩(wěn)定性

CSH顆粒技術也具有HPLC粒徑產(chǎn)品(2.5, 3.5和5μm)，對應于XSelect CSH HPLC柱家族，這確保在HPLC和UPLC技術平臺之間方法可無縫轉換。

ACQUITY UPLC CSH色譜柱

2010年，沃特世推出了新型表面帶電雜化顆粒(CSH?)技術，為雜化顆粒表面賦予少量正電荷。利用這一技術可以使用低離子強度的流動相(如0.1%甲酸體系)分析堿性化合物，而仍能獲得的峰形與載量。CSH技術還允許使用甲酸來替代TFA等離子對試劑，而仍保持帶電分析物的良好峰形，對于質譜分析尤為有利。

ACQUITY UPLC CSH C18色譜柱(pH1-11)

ACQUITY UPLC CSH C18柱克服了大多數(shù)現(xiàn)代C18柱在低離子強度流動相條件下(如0.1%甲酸體系)因載量所導致的峰形差問題。

因帶有嚴格控制下的、低水平的正表面電荷，ACQUITY UPLC CSH C18柱為堿性化合物提供行業(yè)的峰形，而無需使用離子對試劑。

ACQUITY UPLC CSH苯己基柱(pH1-11)

ACQUITY UPLC CSH苯己基柱提供與直鏈C18柱互補的選擇性，特別適用于芳香性分析物。

與CSH C18顆粒的化學耐受性一樣，CSH苯己基柱可在pH1-11條件下使用，可以利用低pH條件和高pH條件獲得不同的分離選擇性。

ACQUITY UPLC CSH氟苯基柱(pH1-8)

ACQUITY UPLC CSH氟苯基色譜柱對位置異構體、鹵代化合物和極性化合物具有優(yōu)異選擇性。部分原因在于多種保留機理的綜合效果，包括偶極-偶極作用、氫鍵作用、芳香性(π-π)作用和疏水作用。但由于帶電表面顆粒[CSH]的*化學特性，與傳統(tǒng)PFP鍵合固定相相比，CSH氟苯基色譜柱可增強對酸性化合物的保留。

ACQUITY UPLC BEH 色譜柱

ACQUITY UPLC BEH C18和C8柱(pH1-12)

因其所帶來的*的峰對稱性、柱效和化學穩(wěn)定性，1.7μm ACQUITY UPLC BEH C18和C8柱是廣泛適用于各種分析物通用的超高效色譜分離柱。因能在pH 1-12范圍內(nèi)操作，這些三鍵鍵合式烷基柱能夠利用pH的能力對可離子化化合物的保留、選擇和靈敏度施加巨大影響，同時還能在低pH和高pH條件下保持優(yōu)異的柱穩(wěn)定性。

ACQUITY UPLC BEH Shield RP18柱(pH2-11)

ACQUITY UPLC BEH Shield RP18柱，除了C18鏈以外還包括一個親水的氨基甲酸酯官能團(極性內(nèi)嵌)，從而對堿性分析物提供優(yōu)異的峰形。該色譜柱也提供相對于直鏈烷基色譜柱的其它選擇性。

ACQUITY UPLC BEH苯基柱(pH1-12)

ACQUITY UPLC BEH苯基柱含有一個三鍵鍵合的苯己基配體，與其他苯基商品柱相比，它提供了行業(yè)的pH穩(wěn)定性、批次重現(xiàn)性和優(yōu)異的峰形。它設計用于提供相對于直鏈烷烴柱互補的選擇性，特別是對于那些含有芳香環(huán)的分析物。

ACQUITY UPLC BEH HILIC柱(pH1-9)

ACQUITY UPLC BEH HILIC柱使用未鍵合BEH顆粒以提高對高極性分析物的保留能力，同時對于極性和可離子化物質的混合物提供相對于反相色譜的正交性的分離選擇性。

該色譜柱經(jīng)優(yōu)化并測試，以確保在UPLC HILIC條件下能提供高效、重現(xiàn)的分離效果。該產(chǎn)品在設計伊始就針對克服既有HILIC固定相的一個重要弱點：化學穩(wěn)定性。結實的BEH雜化顆粒的寬pH耐受能力拓寬了HILIC應用條件范圍，并顯著延長了柱使用壽命。

ACQUITY UPLC BEH Amide柱(pH2-11)

親水作用色譜(HILIC：Hydrophilic Interaction Chromatography)

自從2003年，沃特世就已經(jīng)開發(fā)出創(chuàng)新的固定相用于親水作用色譜分離，以克服對強極性化合物難以保留和分離的挑戰(zhàn)性問題。基于沃特世新穎的BEH顆粒技術，ACQUITY UPLC BEH Amide柱使用化學穩(wěn)定耐受的、三鍵鍵合的酰胺基(Amide)鍵合相，從而為HILIC分離在穩(wěn)定性與通用性方面又開創(chuàng)了新維度。

ACQUITY UPLC BEH Amide柱能夠使用廣泛的流動相pH條件(2-11)，從而可以對在極性、結構片段和pKa值性質上跨越大的極性分析物混合物實現(xiàn)優(yōu)異的保留與分離。

碳水化合物分析

使用HILIC色譜分離的zui多也是zui廣泛的化合物之一就是碳水化合物，例如：單糖、二糖、寡糖和多糖。ACQUITY UPLC BEH Amide柱能夠提供以下優(yōu)勢：

•  1.7μm粒徑允許高效快速地分析復雜樣品
• 更強的化學穩(wěn)定性，允許使用高pH和高溫條件以合并還原性糖差向異構體的岔頭峰，使定量更準確，縮短分析時間。
• 優(yōu)異的色譜柱壽命(pH2-11)，也增強了分析方法的耐用性。
• 與硅膠氨基柱不同，ACQUITY UPLC BEH Amide柱不易生成Schiff堿，從而改善定量準確性。
• 與高pH流動相的兼容性，有助于MS檢測而無需衍生化從而極大簡化了LC/MS分析前的樣品預處理工作，并提高分析靈敏度。該柱也與RI、ELSD兼容。